<tr id="4omga"><xmp id="4omga">
<acronym id="4omga"></acronym>
<rt id="4omga"></rt>
<rt id="4omga"></rt>
<acronym id="4omga"><xmp id="4omga">
<tr id="4omga"><xmp id="4omga">

細胞培養液詳解!

2021-08-12 10:39


         現代生物技術均通過細胞作為載體來進行,無論是基因治療、干細胞、克隆技術都在細胞內進行的。細胞的生長需要一定的營養環境,用于維持細胞生長的營養基質稱為培養基,即指所有用于各種目的的體外培養、保存細胞用的物質,就其本意上講為人工模擬體內生長的營養環境, 使細胞在此環境中有生長和繁殖的能力。它是提供細胞營養和促進細胞生長增殖的物質基礎。細胞培養基其組成成分主要有:氨基酸、 水、 維生素、 碳水化合物、 無機離子及其他一些入核酸降解物、激素等。隨著動物細胞大規模培養技術的迅速發展, 作為細胞培養領域中最基本的原料- 細胞培養基的用量也迅速增加, 被廣泛應用于細胞生物學科和醫學研究的各個領域,如疫苗生產(人用疫苗如乙腦、狂犬、甲肝、乙肝、出血熱、麻疹等,獸用疫苗如口蹄、馬立克、偽狂犬等) ,基因藥物生產(如 EPO、TPA 等) ,臨床用單抗(如抗人肝癌單抗、抗人肺單抗、WT3)等。     

水與平衡鹽溶液
        細胞的生長需要一定的營養環境,用于維持細胞生長的營養基質成為培養基。它是提供細胞營養和促進細胞生長增殖的物質基礎。細胞培養基其組成成分主要有:水、氨基酸、維生素、碳水化合物 、無機離子及其他一些入核酸降解物、激素等。
        培養用水:體外培養的細胞對水質特別敏感,對水的純度要求較高。培養用水 中如果含有一些雜質,即使含量極微,有時也會影響細胞的存活和生長,甚至導 致細胞死亡。用金屬蒸餾器制備的蒸餾水,可能會含有某些金屬離子,一般不作 為培養用水。配制培養用液應使用經石英玻璃蒸餾器三次蒸餾的三蒸水或超純水 凈化裝置制備的超純水。最好用龍頭瓶貯存,存放時間一般不應超過2周。

 緩沖溶液、生理鹽水、平衡鹽溶液

細胞培養基的基本要求
       
       體外培養的細胞直接生活在培養基中,因此培養基應能滿足細胞對營養成分、促生長因子、激素、滲透壓、pH等諸多方面的要求。
一、營養成分
       維持細胞生長的營養條件一般包括以下幾個方面:

1、氨基酸:
      是細胞合成蛋白質的原料。所有細胞都需要12種必須氨基酸:纈氨 酸、亮、異亮、蘇、賴、色、苯丙、蛋、組、酪、精氨酸、胱氨酸。此外還需要谷氨酰胺,它在細胞代謝過程中有重要作用,所含的氮是核酸中嘌令和嘧啶合成的來源,同樣也是合成三、二、一磷酸酰苷所需要的基本物質。體外培養的各種培養基內都含有必需氨基酸。

2、單糖:
     培養中的細胞可以進行有氧與無氧酵解,六碳糖是主要能源。此外六碳糖也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原料。細胞對葡萄糖的吸收能力最高, 半乳糖最低。體外培養動物細胞時, 幾乎所有的培養基或培養液中都以葡萄糖作為必含的能源物質。              

3、維生素:
     主要扮演輔酶、輔基的角色,必不可少。生物素、葉酸、煙酰胺、泛酸、吡哆醇、核黃素、硫胺素、維生素 B12 都是培養基常有的成分。

4、無機離子與微量元素:
      細胞生長除需要鈉、鉀、鈣、鎂、氮和磷等基本元素, 還需要微量元素,如鐵、鋅、硒、銅、錳、鉬、釩等。   

二、促生長因子及激素
       各種激素、生長因子對于維持細胞的功能、保持細胞的狀態(分化或未分化)具有十分重要的作用。有些激素對許多細胞生長有促生長作用,如胰島素,它能促進細胞利用葡萄糖和氨基酸。有些激素對某一類細胞有明顯促進作用,如氫化可的松可促進表皮細胞的生長,泌乳素有促進乳腺上皮細胞生長作用等。

三、滲透壓
       細胞必須生活在等滲環境中,大多數培養細胞對滲透壓有一定耐受性。人血漿滲透壓290mOsm/kg, 可視為培養人體細胞的理想滲透壓。鼠細胞滲透壓在 320mOsm/kg 左右。對于大多數哺乳動物細胞, 滲透壓在260-320mOsm/kg 的范圍都適宜。

四、pH
       氣體也是細胞生存的必需條件之一,所需氣體豐要是氧和二氧化碳。氧參與三羧酸循環,產生能量供給細胞生長、增殖和合成各種成分。一些細胞在缺氧情況下,借糖酵解也可獲取能量,但多數細胞缺氧不能生存。在開放培養時,一般置細胞于95%空氣加5%二氧化碳的混合氣體環境中培養。二氧化碳既是細胞代謝產物,也是細胞所需成分,它主要與維持培養基的pH有直接關系。動物細胞大多數需要輕微的堿性條件,pH值約在7.2~7.4℃在細胞生長過程中,隨細胞數量的增多和代謝活動的加強,二氧化碳不斷被釋放,培養液變酸,PH值發生變化。由于 NaHCO3 容易分解為二氧化碳,很不穩定,致使緩沖系統難以精確地控制。故這一緩沖系統適合密閉培養。HEPES結合碳酸氫鈉使用,可提供更有效的緩沖體系,主要是防止pH值迅速變動,但最大缺點是在開放培養或觀察時難以維持正常的pH值。造成pH波動主要是代謝產生的CO2,在封閉式培養過程中CO2與水結合產生碳酸,培養基pH很快下降。為解決這一問題,合成培養基中使用了 NaHCO3-CO2 緩沖系統,并采用開放培養,使細胞代謝產生的CO2及時溢出培養瓶, 再通過穩定調節溫箱中CO2濃度(5%)與培養基中的 NaHCO3,處于平衡狀態。

五、 無毒、 無污染
       體外生長的細胞對微生物及一些有害有毒物質沒有抵抗能力, 因此培養基應達到無化學物質污染、無微生物污染(如細菌、真菌、支原體、病 毒等) 、無他對細胞產生損傷作用的生物活性物質污染(如抗體、補體) 。對于天然培養基,污染主要來源于取材過程及生物材料本身,應當嚴格選材,嚴格操作。對于合成培養基,污染主要來源于配制過程,配制所用的水,器皿應十分潔 凈,配制


聯系我們

服務支持

我們珍惜您每一次在線咨詢,有問必答,用專業的態度,貼心的服務。

讓您真正感受到我們的與眾不同!

合作流程

為了提供更好的合作體驗,我們提供專業的專線咨詢和上門洽談服務

常見問題

關于產品的使用、售后服務等各種常見問題

售后保障

從銷售支持到后期維護,我們提供全方位360°的立體化服務,只為您的至臻追求

欧美日韩亚洲乱国产综合AⅤ_极品白丝女神私人玩物_亚洲欧美v国产一区二区_富婆裸体按摩对白正在观看